万能核酸酶(同 Benzonase)运用程序阐明

万能核酸酶(同 Benzonase)运用程序阐明

来源:江南游戏官方网站/鱼蛋白肥    发布时间:2023-10-11 10:51:08

超级核酸酶是一种经过基因表达取得的基因工程重组产品。与苯甲酸酶核酸酶类似,它是粘质沙雷氏菌排泄的一种广谱核酸酶,由两个亚基组成,每个亚基巨细为26kDa。它也被称为非限制性核酸内切酶,表现出比DN

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  超级核酸酶是一种经过基因表达取得的基因工程重组产品。与苯甲酸酶核酸酶类似,它是粘质沙雷氏菌排泄的一种广谱核酸酶,由两个亚基组成,每个亚基巨细为26kDa。它也被称为非限制性核酸内切酶,表现出比DNA酶I强34倍的活性。它能够轻松又有用地切开单链和双链DNA和RNA,消化3-5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸(低于杂交极限)。其活性需求Mg2+离子,适宜pH规模为6至10,优选反响温度为37°C。该产品以野生型苯甲酸酶为根底,经过基因工程改进,在酵母中表达和纯化。它具有去甲侧细菌内毒素,并在各种条件下(6M尿素、0.1M盐酸胍、0.4%Triton X100、0.1%SDS、1mM EDTA、1mM PMSF、0.4%脱氧胆酸钠)坚持高稳定性和消化活性。它被广泛用作各种科学研究范畴以及疫苗、蛋白质和多糖制药职业的首选酶制剂,用于去除样品或产品中的核酸残留物,进步样品纯度和产品生物功率。

  一个单位(U)的活性被界说为在2.625ml反响体系中,在37°C和pH 8.0的条件下,在30分钟的反响中引起A260吸收峰改动1.0所需的酶的量(相当于将37μg鲱鱼精子DNA彻底消化成寡核苷酸)。

  1.降解各式各样的方式的DNA和RNA,使其成为在制备疫苗、抗体、细胞疗法和其他生物产品时去除核酸(DNA和RNA)污染的最佳东西,以满意美国食品药品监督管理局的规范,即用来治疗的生物制药中核酸残留量不超越10 pg/剂。

  2.经过降解核酸下降细胞裂解物的粘度,促进溶液过滤/超滤进程,缩短处理时刻,进步病毒、AAV载体和来源于细胞的包容体纯化进程中沉淀物和上清液的别离功率,进步色谱纯化功率,终究进步产值和产品纯度。

  3.在生物剖析中的运用:可用于制备ELISA样品、色谱法、二维电泳(蛋白质图谱)和蛋白质印迹剖析,以进步分辨率和样品回收率。

  将产品与蛋白质底物在37°C下孵育16小时,并运用SDS-PAGE凝胶电泳检测底物。蛋白质底物应该没有明显改变。

  2.超级核酸酶的有用作业时分的温度规模为0~42°C,最适作业时分的温度为37℃。酶活性在低温下或许会下降,但这能够终究靠添加2至5倍量的苯甲酸酶核酸酶或延伸消化时刻(2至3小时)来补偿。

  3.含有很多蛋白质、细胞壁或其他盐的粗产品或许部分按捺酶活性。在这种情况下,有必要添加酶的剂量。

  4.酶活性≥250U/ul。关于小体积制剂,在将酶参加体系之前,能够将其在稀释缓冲液(20mM Tris-Cl pH 8.0,2mM MgCl2,2mM NaCl)中稀释至必定浓度。稀释后的溶液只能在4C下贮存几天。

  该试剂仅用于科学研究范畴,不适用于临床确诊或其他用处。回来搜狐,检查更加多

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