华中农业大学病毒学试验技能第六章病毒纯化ppt

华中农业大学病毒学试验技能第六章病毒纯化ppt

来源:江南游戏官方网站/鱼蛋白肥    发布时间:2023-10-15 17:56:49

病毒体具有必定巨细、形状和密度,可使用超速离心 皂土在酸性条件下(pH4~)可吸附轮状病毒,在碱性条件下(),又使其洗脱下来。 鱼精蛋白为碱性蛋白,具有带着其它蛋白质(直径大于50nm

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  病毒体具有必定巨细、形状和密度,可使用超速离心 皂土在酸性条件下(pH4~)可吸附轮状病毒,在碱性条件下(),又使其洗脱下来。

  鱼精蛋白为碱性蛋白,具有带着其它蛋白质(直径大于50nm )共沉积的效果,当向这种沉积物参加1mol/L NaCl时,其它蛋白质又从头开释到悬液中,而鱼精蛋白依然沉积。

  原理:溶质在两个互不相溶的溶剂平分配系数的不同而挑选性地分配于其间的一方。

  原理:使用对病毒或对杂质有挑选吸附才能的固体吸附剂吸附病毒或吸附杂质,再用必定的盐溶液把它们洗脱下来。

  使用超滤膜将水、盐及小分子滤过,将必定巨细的大分子或病毒等颗粒截住从而使后者得到浓缩。

  用处:从安排培养液、鸡胚尿囊液或通过红细胞吸附开释的病毒悬液中提纯病毒。

  过程:低速(2000-3000r/min, 20-30min)、中速(10000min, 20-30min)去除较大的宿主细胞碎片、污染的细菌及其它较大的杂质。再挑选较高速度离心1-2h使病毒沉积。

  根据需要纯化的病毒的性质、开始资料的特色、研讨的意图以及试验室的条件等,挑选适合的纯化办法。

  将伪狂犬病病毒接种于PK-15细胞,病变后搜集细胞培养物,重复冻融3次,即为样品资料。

  去细胞碎片及杂质:将细胞培养物4℃ 3000r/min离心30min,搜集上清液。

  硫酸铵沉积:,搅匀后置4℃冰箱拌和沉积过夜,4℃ 5000r/min离心40min,去上清,沉积用适量的灭菌ddH2O悬浮。

  透析:将悬浮的病毒液装于透析袋中,于ddH2O或PBS中拌和透析,每半

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