每次打开 EP 管盖子前，确认胶块在管内，并将胶块甩至管底。开盖子动作尽量轻巧，以免胶块弹出。

  ，取30-35份预处理后的鱼肉，加入14-16份水，再加入木瓜蛋白酶，加入量为300-600IU/g，在pH为8-9，温度为35-40℃的条件下，酶解0.5-1h，得酶解物。

  酶解过程所生成的少量短肽以及氨基酸可以大幅度增加食品的风味，且该条件下鱼肉蛋白质酶解程度低，酶解物中依然含有大量未酶解的鱼肉蛋白，不影响后续的斩拌过程。

  胰蛋白酶是酶解鱼蛋白的最佳搭档。鱼蛋白是一种具有多种功能的抗菌肽，具有抗菌活性，并且具有多肽链的结构，在体内需要通过酶解来发挥最佳的作用。而胰蛋白酶是一种分解蛋白质的消化酶，在将蛋白质消化分解为多肽和氨基酸的过程中能够将鱼蛋白的多肽链进行特异性的酶解，是酶解鱼蛋白的最佳搭档。除了胰蛋白酶外，一些其他的酶也能够酶解鱼蛋白，如蛋白酶K、草酸酶等。但相比之下，胰蛋白酶具有特异性更高、效率更高等优势，因此更适合于酶解鱼蛋白。此外，在不同的条件下，胰蛋白酶的最适酶解条件也会有所区别，需要根据实验设计采用不同的酶解条件。

  蛋白酶全名为“蛋白质水解酶”，就 是一种能使蛋白质水解成多肽链或氨基 酸的有机物。蛋白质是氨基酸连成的长 链，如果氨基酸数量比较少就称为肽链，如果氨基酸达到一定数目就称为蛋白质。

  蛋白酶促进蛋白质和水反应，变成 氨基酸。催化蛋白质水解的酶类种类很多，重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。蛋白酶对所作用的反应底物有严格 的选择性,一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键，如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键。

  由于动 植物资源有限，工业上生产蛋白酶制剂主要利用枯草杆菌等微生物发酵备。蛋白酶主要存在于人和动物消化道中，在植物和微生物中含量丰富。

  鱼蛋白可以通过特殊酶来进行解析，例如 trypsin 和 endopeptidase。Trypsin 是一种从胰蛋白酶和生物碱基中分离出来的酶，它可以水解在保留室内羧基的情况下穿越脂肪质膜，而endopeptidase 可以水解键在肽链存在能量不足的构象。

  是一种化学方法,就是用生物酶去除一些结构。酶是专一高效的催化剂,例如纤维素酶可以催化纤维素分解,蛋白酶可以催化蛋白质分解。酶解工艺就是用酶类使该种酶的作用对象分解。

  一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键,如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键.蛋白酶分布广,主要存在于人和动物消化道中

  降解程度温和，限度保留了海洋鱼类肉质中的营养成分和活性，不会对其他有效成分造成破坏，生成的鱼蛋白产品为高蛋白营养有机物，除蛋白质、小分子多肽、游离氨基酸外，还有维生素、甲壳素等活性物质，没有废弃物，限度利用资源。

  市场上大部分鱼蛋白企业都是以酶解为主。而这其中包括海大温喜生物、浙江丰宇三立、浙江新田龙、美国普利登、青岛颂田、浙江德邦、浙农海洋、荣成鸿德海洋、国农生物、烟台绿云、广西勤德、台湾味丹、青岛润扬、山东沃土源、宁波吉丰等。

  反应条件温和，营养物质流失少，氨基酸不易破坏，多肽、小肽、寡肽含量高，分解产生不饱和脂肪和作物促进因子，纯有机提出，无有害物质残留。

  可以吃。酶解过程所生成的少量短肽以及氨基酸可以大幅度提升食品的风味，且该条件下鱼肉蛋白质酶解程度低，酶解物中依然含有大量未酶解的鱼肉蛋白，不影响后续的斩拌过程。

  2.用超纯水洗胶块，然后振荡1 min，放置5-10 min 洗去胶上的杂质。然后倒出液体，再加超纯水重复洗一遍，吸水纸吸去液体。

  3. ⑴银染脱色：脱色液配制：30 mmol/L K3Fe(CN)6 : 100 mmol/LNa2S2O3=1:1，用前新鲜配制。（参考配制2 mL：K3Fe(CN)6 ：9.9 mg溶于1ml超纯水中，15.85 mg溶于1 mL超纯水中，1：1混匀）注意事项：每次加10个样，加完脱色液后置白纸上观察，颜色脱去后马上加水100 uL冲洗停止反应， 2分钟内吸出，再加100ul水重复洗两次，直到完全洗掉脱色液颜色（胶变得透明），脱色后加入50%乙腈，放置15 min后，吸出液体。

  ⑵考染脱色：加入50％乙腈，37℃水浴脱色，约30 min。能够正常的看到胶上染料基本除去，变透明。如胶上颜色残余较深，可将液体吸出，再重复一遍，直至染料脱去，胶块变透明。

  4.100%乙腈脱水至胶块变成白色，放置，若胶块没有变白，可将乙腈吸出，再加入100%乙腈脱水一次。

  6.从水浴锅取出样品后，室温冷却，去掉液体，迅速加入同体积的烷基化试剂室温暗处放置30 min.

  10.每管加入适量的酶液（约2-3 μL），冰上放置30 min，直至胶块吸涨酶液。

  11.检查酶液吸胀情况，多余的酶液吸走，酶液不够，即胶块中仍有白色，则加入适量酶液。

  2、每次打开EP管盖子前，确认胶块在管内，并将胶块甩至管底。开盖子动作尽量轻巧，以免胶块弹出。

  以上就是胶内蛋白样品的酶解基本过程，希望对大家能起到一定的帮助，如果大家对此方法有任何疑问或建议，欢迎各位在推文下面进行留言，同时小编会根据大家的反馈，进行更进一步的说明和补充。最后，祝愿科研道路上的大伙们都能数据多多，文章多多，如果您觉得资源对您起到一定的帮助，请多多转发，以帮助更多需要帮助的人!

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