来源:新闻动态 发布时间:2023-11-24 12:05:29
Western抗体洗脱液(Stripping buffer)又称膜再生液或Western一抗二抗去除液,用于Western中转移了蛋白的膜的重复运用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测GAPDH、β-actin等表达量相对来说比较稳定的管家蛋白或其它蛋白作为参照。Stripping buffer能够洗脱一抗二抗,十分快捷地从头运用运用过的膜,检测其它蛋白。 Stripping buffer屡次重复运用同一张膜,会导致蛋白信号的削弱不宜重复运用膜,一般能运用2~4次。
NobleRyderWestern Stripping buffer(酸性)主要是依托酸性来免除一抗二抗的结合,一起又不会导致转移到膜上的蛋白的丢失, 适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复运用,十分适合于PVDF膜,其次为硝酸纤维素膜。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB,NBT/BCIP)不适用于本试剂。
4、弃液,尽量把Western Stripping buffer去除洁净,必要情况下,能够用滤纸吸干。
5、参加TBS、TBST或PBS振动漂洗3~4次,每次在摇床上漂洗3~5min。
1.运用辣根过氧化物酶符号的抗体时,封闭液一定要运用5%脱脂奶粉制造。运用碱性磷酸酯酶符号的抗体时,封闭液一定要运用酪蛋白(casein)制造。
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