蛋白质是生命体中最重要的根本组成部分之一,它们在细胞的结构和功用中起着至关重要的效果。蛋白质提取的原理是运用蛋白质的物理和化学性质进行别离和提取。
丁香试验约请有 3 年以上蛋白质经历的硕博试验高手,替我们答疑解惑。 从「蛋白质提取」的试验过程到保存,带你手把手完善蛋白质提取试验。
接下来引荐 3 个丁香试验协作专家投稿的试验 protocol,通过多年验证,可操作性强。
首要,贮存办法的挑选取决于蛋白质的安稳性,以及后续试验运用蛋白质的时刻和用处。贮存时需求防止挨近蛋白质安稳极限的贮存条件(例如极点 pH 或许挨近蛋白质等电点的 pH)。
2. 在 4°C 超越 24 小时需求细心考虑对蛋白样品灭菌过滤(运用 0.22 µm 过滤器),或许参加抑菌剂(例如 0.1% 叠氮化钠)以防止细菌成长。有必要留意一下的是,并非一切蛋白质都能在 4°C 长时刻坚持安稳。
3. 长时间保存(一周以上)需求将蛋白样品冻存。运用液氮或许干冰/乙醇混合物将其快速冷冻防止蛋白质变性。可以将样品分装至多个管子中,来防止重复冻畅通领悟形成的活性下降或影响结构。
4. 保存几个月:可以将其保存在-20°C,并参加 50% 甘油防止冻住。
5. 保存几个月至几年:此刻应把样品在-80°C 或液氮中冷冻。在这种温度下,加甘油就没那么有必要了,但加 5~50% 的甘油可以在必定程度上协助坚持蛋白质的安稳性。
假如以上内容不能解决你自己的试验问题,也能进入小程序进行发问,48 小时内有问必答。海量根底科研经历的硕博士,会替我们答疑解惑。一起来优化细胞试验吧!
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